CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8＋T细胞毒性功能的影响

摘要

目的探讨CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+ T细胞毒性功能的影响。方法 40只雄性C57小鼠按随机数字表法随机分为CD40+/+对照组、CD40+/+烟熏组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组4组,烟熏组采用烟草烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型。各组肺组织分别采用HE染色观察肺部病理改变并计算肺泡平均内衬间隔;免疫组织化学法检测CD8+ T细胞和穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比;实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测穿孔素、颗粒酶B、白细胞介素（IL）-27 mRNA表达;酶联免疫吸附（ELISA）法检测IL-27细胞因子水平。结果 CD40+/+烟熏组肺组织明显破坏,可见大量炎症细胞浸润;CD40-/-烟熏组肺组织破坏及炎症细胞浸润程度较CD40+/+烟熏组轻。CD40+/+烟熏组肺泡平均内衬间隔显著高于CD40+/+对照组、CD40-/-对照组和CD40-/-烟熏组[（37.2±3.6）比（24.0±3.4）、（22.5±2.4）、（29.9±1.7）μm ]（均P＆0.05）;CD40-/-烟熏组高于CD40+/+对照组及CD40-/-对照组（均P＆0.05）。CD40+/+烟熏组CD8+、穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比[（16.3±2.3）%、（11.4±2.1）%、（10.7±1.9）%]均显著高于CD40+/+对照组[（8.3±1.6）%、（5.1±1.2）%、（4.6±1.0）%]、CD40-/-对照组[（6.4±1.5）%、（4.3±1.0）%、（4.2±1.0）%]、CD40-/-烟熏组[（8.6±1.7）%、（5.6±1.3）%、（5.5±1.3）%]（均P＆0.05）。CD40+/+烟熏组穿孔素、颗粒酶B、IL-27 mRNA相对表达量[（20.3±7.3）、（18.3±12.3）、（2.2±0.7）]均显著高于CD40+/+对照组[（9.4±4.8）、（10.6±3.8）、（1.3±0.6）]、CD40-/-对照组[（8.1±3.1）、（7.7±3.5）、（1.1±0.5）]、CD40-/-烟熏组[（12.9±6.2）、（10.4±4.6）、（1.5±0.4）]（均P＆0.05）。CD40+/+烟熏组细胞因子IL-27水平显著高于CD40+/+对照组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组[（3 242±754）比（1 627±710）、（1 600±680）、（1 850±583）ng/L ]（均P＆0.05）。结论 CD40基因敲除可以抑制烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能,减轻肺气肿程度。