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抗MS_2多聚酶单克隆抗体的制备及鉴定

     

摘要

应用MS_2-X蛋白(含MS_2多聚酶的98个氨基酸,乙型肝炎X抗原的145个氨基酸)免疫小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合后,经阳性克隆检测,克隆化及体外传代培养,共筛选出了2株抗MS_2多聚酶的单克隆抗体,这在国内尚未见报道。经ELISA及Western Blot实验证实,此2株单克隆抗体只能与MS_2多聚酶发生反应,而不能与乙型肝炎X抗原和正常细菌蛋白发生反应,其抗体亚类为IgG_1,腹水效价为1∶32000~1∶64000。应用抗MS_2单克隆抗体,可以建立亲和层析技术,高效快速地将基因工程表达的MS_2多聚酶—目的蛋白融合蛋白,从大量的细菌蛋白中纯化出来,这对深入研究目的蛋白的结构与功能具有十分重要的作用。

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