马兜铃酸Ⅳa与2'-脱氧核苷体外反应形成加合物的LC-MS/MS研究

摘要

目的 利用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)研究马兜铃酸Ⅳ_a(aristolochic acid Ⅳ_a,AA Ⅳ_a)与2′-脱氧核苷在溶液中的反应,检测可能的加合物,为进一步研究奠定基础。方法 马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷在锌尘存在下37℃孵育,通过LC-MS/MS中性丢失模式筛选反应产物,再通过质谱碎裂方式和高分辨质谱进行验证。结果 马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷的反应较为复杂,产生多种产物。根据预期的加合物分子量(分别为558和574)以及是否具有明显的[MH-116]+子离子,分别筛选到3种和4种可能的2′-脱氧腺嘌呤核苷和2′-脱氧鸟嘌呤核苷加合物。同时,还发现了非“常规”的加合物。在马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷反应混合物中,发现了1种分子量572的可能加合物,而在马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧鸟嘌呤核苷反应混合物中则发现了3种分子量590的可能加合物。结论 马兜铃酸Ⅳ_a与2′-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷体外条件下能够发生反应形成可能的加合物,但加合物结构尚需通过核磁共振光谱确定。