逍遥散对四氯化碳诱导的急性肝损伤的保护作用及其机制

摘要

目的探讨逍遥散对四氯化碳诱导的急性肝损伤小鼠的保护作用及其机制。方法将48只雄性ICR小鼠按体重随机分成正常组、模型组、逍遥散低剂量组、逍遥散中剂量组、逍遥散高剂量组、双环醇组,每组8只。逍遥散低、中、高剂量组分别给予1 g/mL、2 g/mL、3 g/mL(按生药量计算)逍遥散灌胃,双环醇组给予110 mg/kg双环醇片悬液灌胃,每日1次,连续1周。随后除正常组外,其余组采用四氯化碳腹腔注射制作急性肝损伤模型,24 h后处死各组小鼠并收集血清及肝组织样本。采用全自动生化分析仪测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,病理组织切片HE染色观察肝脏损伤情况并半定量评估其程度,比色法检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,ELISA法检测肝组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,蛋白质印迹法(Western blot)测定肝组织中Janus激酶2(JAK2)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠血清ALT、AST、LDH水平均显著升高(P均<0.05);HE染色显示小叶中央静脉周围肝细胞损伤严重,伴有中性粒细胞浸润;肝组织中MDA、IL-6、TNF-α含量及p-JAK2、p-STAT3、cleaved-Caspase3蛋白表达量均显著升高(P均<0.05),肝组织中SOD含量及p-Bcl-2蛋白表达量均显著下降(P均<0.05)。与模型组比较,逍遥散各剂量组和双环醇组小鼠血清ALT、AST、LDH水平均显著降低(P均<0.05);HE染色显示炎症程度及肝细胞受损轻;肝组织中MDA、IL-6、TNF-α含量及p-JAK2、p-STAT3、cleaved-Caspase3蛋白表达量均显著降低(P均<0.05),肝组织中SOD含量及p-Bcl-2蛋白表达量均显著升高(P均<0.05),且逍遥散各剂量组上述指标均呈剂量依赖性改善(P均<0.05)。结论逍遥散可以显著减轻四氯化碳诱导的急性肝损伤,其机制可能与抑制JAK2-STAT3信号通路及其下游炎症级联和凋亡信号有关。