基于LoxP-Cre系统的Ronin基因造血系统条件性敲除小鼠模型的构建及鉴定

摘要

目的 建立Ronin基因造血系统条件性敲除的小鼠模型.方法 基于LoxP-Cre系统设计基因敲除策略,获得Roninflox/+(flanked by loxP)小鼠,分别与Vav-iCre+小鼠、Roninflox/+小鼠交配繁殖得到Roninflox/+Vav-iCre+小鼠和Roninflox/flox小鼠,再将后两种小鼠交配获得Roninflox/flox Vav-iCre+小鼠.提取鼠尾组织DNA,PCR扩增后鉴定基因型,提取小鼠造血相关组织蛋白,Western印迹检测Ronin表达情况.结果 Roninflox/+Vav-iCre+小鼠与Roninflox/flox小鼠交配所得子代共51只小鼠中,Roninflox/flox Vav-iCre+基因型小鼠仅1只,实际出生数量远低于理论值,且小鼠出生1周内死亡.Roninflox/+Vav-iCre+基因型小鼠可正常存活,其造血相关组织中Ronin表达低于野生型小鼠.结论 该研究构建了造血系统特异缺失Ronin基因的小鼠,为研究Ronin在早期造血调控中发挥的作用提供了动物模型.