长双歧杆菌NCC2705纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白的黏附作用研究

摘要

目的：验证功能蛋白烯醇化酶（enolase）和Tuf蛋白是否为长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）NCC2705的黏附因子。方法将长双歧杆菌NCC2705与Caco-2细胞共培养，显微镜观察加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白前后细胞黏附细菌数的变化并进行统计学分析。将Caco-2细胞、长双歧杆菌NCC2705、致病菌（弗氏志贺菌或伤寒沙门菌）共培养，检测加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白前后上清液中乳酸脱氢酶（ LDH）和肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）的水平。结果加入纯化蛋白烯醇化酶、Tuf蛋白之后，Caco-2细胞黏附细菌数显著降低（P＜0．05）。 Caco-2细胞与致病菌共培养时，LDH和TNF-α的水平显著增高（P＜0．05）；Caco-2细胞与长双歧杆菌NCC2705和致病菌共培养时，LDH和TNF-α的水平显著降低（P＜0．05），然而加入纯化蛋白烯醇化酶和Tuf蛋白后，LDH和TNF-α的水平又出现显著增高（P＜0．05）。结论长双歧杆菌NCC2705可竞争性抑制致病菌对肠上皮细胞的黏附，而烯醇化酶和Tuf蛋白可竞争性抑制长双歧杆菌对肠上皮细胞黏附作用，是双歧杆菌的黏附因子。