抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其抗毒效应

摘要

目的 :为制备高毒性的小分子生物毒素河豚毒素 （TTX）的单克隆抗体 （mAb） ,探讨TTX中毒免疫抗毒的可能性。方法 :以TTX为半抗原 ,与中国鲎血蓝蛋白 （TTH）化学偶联制备人工抗原 （TTXTTH） ;并以其免疫BALB c小鼠。用杂交瘤技术制备抗TTX的mAb ,用竞争抑制酶免疫分析法测定mAb对TTX结合活性 ,以mAb与检测抗原的结合被抑制 5 0 %时的TTX浓度 （IC50 ）表示mAb的结合反应性。对小鼠预防注射抗体 ,测试抗体对抗TTX中毒的效果。结果 :建立了 2株对TTXBSA阳性反应的mAb（1E4和 3C11） ,均属IgG1 亚类 ;具有TTX结合活性 ,其IC50 值分别为 3.2× 10 6 mol L和 9.9× 10 7mol L ;亲和力常数 （Kaff）分别为 3.0× 10 6 L mol和 2 .8× 10 6 L mol。小鼠预防给予mAbs ,可对抗 1×LD的TTX攻毒 ,动物存活率 71% ;抗 1.5×LD时 ,1 3存活 ;抗毒效果好于小鼠抗血清对照。结论 :用新的TTX人工抗原成功地制备了抗TTX的mAb ,具有一定的体内预防抗毒效价。