重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆和表达

摘要

目的:克隆人KGF-2基因,并在大肠杆菌中进行表达.方法:通过PCR扩增,从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2的cDNA,并将其分别克隆入pBV220,pLEX和pGEX4T-1质粒中,研究其在不同表达质粒和大肠杆菌中的表达情况.结果:克隆得到的KGF-2 cDNA经测序证明与文献报道的序列一致.将其克隆于pBV220质粒中,在E.coli JM109中表达量相对最高,约占菌体总蛋白的4%;克隆于pLEX质粒中,在E.coli GI724中的表达量约占全菌总蛋白的5%;克隆于pGEX4T-1中,在E.coli JM109中的表达量可占到全菌总蛋白的20%.结论:采用GST 融合蛋白表达质粒pGEX4T-1对KGF-2进行表达,较pBV220和pLEX具有明显优势,能实现对KGF-2的高效表达,为进一步的功能研究奠定了基础.