禽源大肠杆菌耶尔森氏菌强毒力岛核心基因的检测及其irp2和int基因同源性

摘要

[目的]为了提高禽源大肠杆菌中耶尔森氏菌强毒力岛(HPI)的检测效率,了解高分子量铁调节蛋白2基因(irp2)和整合酶基因(int)在不同株禽源HPI+大肠杆菌间的同源性,进一步揭示禽源大肠杆菌HPI的转移规律.[方法]利用L16(44)正-交试验设计,建立针对HPI核心基因irp2和fyuA的双重PCR,运用双重PCR方法检测禽源大肠杆菌临床分离株,并对检出的7株HPI阳性(HPI+)大肠杆菌进行irp2和int基因测序及同源性分析,同时结合这7株大肠杆菌的ERIC-PCR分析结果,对比分析int基因的分布特点.[结果]结果显示,新建立的双重PCR能特异性扩增出HPI核心基因；ERIC-PCR分析显示,HPI+大肠杆菌间差异均大于5％; HPI+大肠杆菌irp2基因高度保守(同源性大于99％),而int基因虽然都位于asn-tRNA位点,但基因序列在部分菌株间存在较大差异.[结论]建立了一种可以用于HPI的流行病学调查和实验室诊断的双重PCR方法,并推测区域外同源重组可能是HPI基因在大肠杆菌间水平转移的主要方式.