桑氏链霉菌KJ07抗菌蛋白的分离纯化及部分特性

摘要

[目的]桑氏链霉菌(Streptomyces sampsonii)J07对无性阶段的杨树紫纹羽病菌(Rhizoctonia violacea)有较强的拮抗作用.为研究其抗菌物质,对其发酵液中主要抗菌物质进行分离纯化并明确其部分性质.[方法]采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-50分子筛层析等方法进行分离纯化.[结果]获得单一抗菌活性蛋白,分子量约为28.4 kD.该抗菌蛋白抑菌谱较广,能使R.violacea菌丝畸形,菌丝隔膜不明显,细胞壁及胞内原生质开始降解,并产生黑色物质.稳定性试验显示抗菌蛋白最适温度为25℃,最佳pH为6.0,当温度≥60 ℃时,抑菌活性下降大于20％,当pH＜4.0或≥8.0时,抑菌活性下降大于12％.其活性还受金属阳离子影响,但对蛋白酶K不敏感.利用自动Edman降解法测得抗菌蛋白N端10个氨基酸序列,但通过NCBI BLAST程序未检索到与其相似性较高的已知抗菌蛋白.[结论]推测该抗菌蛋白可能是一种新的蛋白质.