抗菌蛋白

摘要： 近日,中国农业科学院棉花研究所棉花病害防控与风险评估创新团队开展了棉花黄萎病生物防治研究,从棉花内生蜡状芽孢杆菌中鉴定出一种能抑制病原菌生长并对寄主具有诱导免疫活性的新型抗菌蛋白环糊精糖基转移酶,对防治棉花黄萎病具有重要意义。相关研究成果在线发表在《分子植物病理(Molecular Plant Pathology)》上。

摘要： 以抑菌率为指标,采用单因素试验和响应面法对枯草芽孢杆菌S-16菌株产抗菌蛋白的发酵条件进行优化.结果表明,以可溶性淀粉为碳源,大豆蛋白胨为氮源,初始pH值为7.5的LB液体培养基,接种量为4.74％,在温度为34°C条件下振荡培养53 h,转速为200 r/min为菌株最佳发酵条件.在此条件下纯化得到的抗菌蛋白分子量约为35 ku,对向日葵核盘菌抑菌率达58.6％,比优化前提高了3.19倍.稳定性试验结果表明,抗菌蛋白0～80°C、pH值为2～10时均有抑菌活性,说明该蛋白具有很好的热稳定性和酸碱稳定性.

摘要： 为寻找天然、广谱及抗菌效果较好的抗菌物质,以短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)为研究材料,采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-100、SDS-PAGE和HPLC-MS/MS等方法对其所产的抗菌蛋白进行分离纯化及鉴定,结果显示该抗菌蛋白是一种分子量为32 kDa的鞭毛蛋白.进一步对其抗菌性能进行研究,发现该抗菌蛋白的抑菌谱较广,可抑制常见的食源性致病菌和植物病害真菌,对蜡样芽孢杆菌、产气大肠杆菌和小麦赤霉菌的抑菌圈分别达到:24.82±0.42mm,23.45±0.23mm,25.15±0.12mm.研究结果可为植物生防试剂和新型天然食品防腐剂的开发及应用奠定理论基础.

摘要： 为寻找天然、广谱及抗菌效果较好的抗菌物质,以短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)为研究材料,采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-100、SDS-PAGE和HPLC-MS/MS等方法对其所产的抗菌蛋白进行分离纯化及鉴定,结果显示该抗菌蛋白是一种分子量为32 kDa的鞭毛蛋白.进一步对其抗菌性能进行研究,发现该抗菌蛋白的抑菌谱较广,可抑制常见的食源性致病菌和植物病害真菌,对蜡样芽孢杆菌、产气大肠杆菌和小麦赤霉菌的抑菌圈分别达到:24.82±0.42 mm,23.45±0.23 mm,25.15±0.12 mm.研究结果可为植物生防试剂和新型天然食品防腐剂的开发及应用奠定理论基础.

摘要： 甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)Hg18是一种新型生防类细菌,能产生多种抗菌活性物质.通过50％(NH4)2 SO4饱和溶液沉淀透析除盐,从甲基营养型芽孢杆菌Hg18中分离到抗菌粗蛋白,经凝胶过滤层析、离子交换层析、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化得到抗菌蛋白,并对抗菌蛋白的性质进行了探究.结果表明,该抗菌蛋白对尖孢镰刀菌有很强的抑菌活性,且抑菌活性具有较好的热稳定性、酸碱稳定性、紫外线稳定性和光稳定性,可以作为潜在的生防资源进行开发与应用.

摘要： 为了提高解淀粉芽孢杆菌B-4M-6菌株胞外产抗菌蛋白的能力,以抑制大肠杆菌的能力为检测指标,优化该菌株胞外产抗菌蛋白的发酵条件.通过单因素试验选择B-4M-6菌株产抗菌蛋白培养所需的最佳碳源、氮源、无机盐种类;通过正交试验法对该菌株产抗菌蛋白的培养基配方和培养条件进行优化.研究表明,B-4M-6菌株产抗菌蛋白最优培养基组成为糊精4％,蛋白胨2.5％,ZnSO40.09％,MgSO 40.05％,初始pH值为5.0;最优培养条件为种子液按8％的接种量接种于70 mL/250 mL的锥形瓶中,26°C、180 r/min,培养24 h.优化后,胞外产抗菌蛋白相应的抑菌圈面积增大至404.15 mm2,与优化前相比增幅达2.26倍.说明通过发酵条件优化,获得了B-4M-6菌株发酵产抗菌蛋白最佳培养基组成和培养条件,抗菌蛋白产量得到了明显提高.

摘要： 为了提高解淀粉芽孢杆菌B-4M-6菌株胞外产抗菌蛋白的能力,以抑制大肠杆菌的能力为检测指标,优化该菌株胞外产抗菌蛋白的发酵条件。通过单因素试验选择B-4M-6菌株产抗菌蛋白培养所需的最佳碳源、氮源、无机盐种类;通过正交试验法对该菌株产抗菌蛋白的培养基配方和培养条件进行优化。研究表明,B-4M-6菌株产抗菌蛋白最优培养基组成为糊精4%,蛋白胨2.5%,ZnSO_(4)0.09%,MgSO_(4)0.05%,初始pH值为5.0;最优培养条件为种子液按8%的接种量接种于70mL/250mL的锥形瓶中,26°C、180r/min,培养24h。优化后,胞外产抗菌蛋白相应的抑菌圈面积增大至404.15mm^(2),与优化前相比增幅达2.26倍。说明通过发酵条件优化,获得了B-4M-6菌株发酵产抗菌蛋白最佳培养基组成和培养条件,抗菌蛋白产量得到了明显提高。

摘要： 随着抗生素的大量使用和耐药致病菌的频繁出现,噬菌体作为新型抗菌手段而成为研究热点。噬菌体尾突蛋白在噬菌体侵染细菌中发挥着非常重要的作用,不仅负责识别宿主受体,而且具有解聚酶或糖苷水解酶的抑菌活性。目前揭示噬菌体尾突蛋白的结构和功能的进展增多,了解噬菌体尾突蛋白的结构和功能有助于明确噬菌体的多样性和生命复制循环过程,更好地应用和开发噬菌体相关抗菌制剂。本文就噬菌体尾突蛋白的结构、功能及应用的研究进展展开综述,从尾突蛋白的角度加深对噬菌体的生物学认识。

摘要： 目的 探究可口革囊星虫体腔液的抗菌特性.方法 以7种常见菌(大肠埃希菌、腐败希瓦菌、副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、溶壁微球菌)为受试菌,以生长曲线为指标,研究了可口革囊星虫体腔液和体腔细胞破碎液的抗菌效果;并测定了可口革囊星虫体腔液的抗菌稳定性;并通过葡聚糖凝胶柱层析对体腔液进行了分离纯化.结果 可口革囊星虫体腔液对大肠埃希菌、腐败希瓦菌、副溶血性弧菌3种革兰阴性菌有显著的抑制作用(P＜0.05),而体腔细胞破碎液则无.紫外线照射会降低其抗菌活性;30°C时抗菌活性最高;Cu2+、Zn2+对抗菌活性具有促进作用,Pb2+、Al3+、K+、Ca2+能够抑制抗菌活性;同时中性条件下抗菌效果最好;并对蛋白酶K和胰凝乳蛋白酶较敏感.分离纯化得到了两个蛋白峰a和b,其中b峰具有明显的抗菌活性其分子量在10～15kD之间.

摘要： 在多黏类芽孢杆菌WY110产生的对稻瘟病菌具拮抗活性的抗菌蛋白编码基因(licP)克隆测序的基础上,为构建融合蛋白表达载体和获得与天然蛋白质序列完全一致的目的蛋白,以含有licP基因的重组质粒DNA为模板,设计引物时加入两端酶切位点及肠激酶裂解位点,通过PCR扩增引入目的基因中,测序结果表明接头和读框正确.对目的基因进行双酶切后与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-3X定向连接,转化大肠杆菌JM109,成功构建了重组表达载体pGLE1.经IPTG诱导表达,超声破碎菌体,收获细胞总裂解物;SDS-PAGE分析表明,融合蛋白获得高效表达,分子量约为50 kD,表达量约占菌体总蛋白的30％.采用谷胱甘肽亲和层析柱纯化GST融合蛋白,经肠激酶特异性裂解释放出目的蛋白.生物活性测定结果表明,目的蛋白具有β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性并对稻瘟病菌具有明显抑菌活性.

摘要： 本研究将枯草芽孢杆菌R21—4抗菌蛋白等几种保鲜液应用于鲜猪肉中进行了防腐保鲜试验。结果表明，各组保鲜液防腐效果均好于对照，3％乳酸钠的防腐效果要好于640AU／mL抗菌蛋白，0．1％山梨酸钾效果次之；对鲜猪肉馅儿中的微生物进行抑菌试验，37°C培养24h以及4°C培养12天时64AU／mL抗菌蛋白处理组和128AU／mL．抗菌蛋白处理组均表现明显的抑菌效果。

摘要： 本文报道了从多粘类芽孢杆菌WY110菌侏中分离得到一种对稻瘟病菌具有很强的抑菌作用的抗菌蛋白P,验证了该蛋白具有β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性,并以WY110基因组DNA为模板,采用高保真特性的DNA聚合酶通过PCR扩增克隆了P蛋白的编码基因,测定了全长序列,旨在为研究基因的结构和功能及其在水稻抗病基因工程中心应用奠定基础,亦有助于深入研究此菌株的功能和揭示抑菌作用机理.

摘要： 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtiliss(Ehrenberg)Cohn)XM16菌株，是作者从苹果树上分离得到的一种对苹果霉心病等多种病原真菌具有强烈抑制作用的拮抗菌株。XM16菌株培养液经硫酸铵分级盐析和Sephadex G-100及DE32柱层析后，分离纯化得到一种抗菌蛋白。该抗菌蛋白通过SDS-PAGE分析测定的分子量为60000，等电点约为5.5，偏酸性；对100°C以上高温稳定；通过氨基酸组分测定分析，该抗菌蛋白含有12种不同的氨基酸，含量最高的3种氨基酸为谷氨酸Glu、天门冬氨酸Asp和精氨酸Arg，未测定出组氨酸His等。此抗菌蛋白对Alternaria alternata等真菌病原的抑菌机理主要表现为：抑制病菌孢子萌发，使孢子发芽异常；使菌丝畸变，细胞壁溶解，原生质泄漏。XM16菌株抗菌蛋白对10种测定的病原真菌，均具有良好的抑制效果，表明对病原真菌具有广谱的抑制作用。

摘要： 枯萎病拮抗菌BC98-Ⅰ是从沤肥浸渍液中分离筛选出的对多种蔬菜及花卉等病害有强烈拮抗作用的菌株。为探明其抑菌机制，本文对其发酵液进行了抗菌蛋白的提取及部分特性研究。

摘要： 本实验选择日本鳗鲡的重要免疫器官——脾脏作为抗菌蛋白分离纯化的材料。采用10%醋酸粗提，结合切向流超滤分别获得大于10 kDa和小于10kDa两部分蛋白样品，检测这两部分蛋白对分离至患病日本鳗鲡的致病菌B01、B18、B27菌株的抗菌活性，通过电泳分析这两部分样品的蛋白成分及其大小，选择小于10 kDa的部分进一步采用阳离子交换层析分离具有抗菌活性物质。所获得的离子交换洗脱峰经过脱盐处理后检测其对B01、B18、B27菌株的抗菌活性。结果表明，小于10 kDa样品抗菌活性比大于10 kDa样品强;小于10 kDa样品经离子交换层析后其洗脱峰脱盐处理后同样对B01、B18、B27菌株有较强的抗菌活性。本实验摸索了从日本鳗鲡脾脏中分离纯化抗菌活性物质的方法，同时也证明了日本鳗鲡脾脏中存在具有抗菌活性的蛋白，为进一步研究日本鳗鲡脾脏抗菌活性物质积累基础数据。

摘要： 本试验系统地研究了一株能够有效拮抗姜瘟病病原菌ZT(Ralstonia solanacerum)菌株J1的发酵液粗提蛋白的拮抗谱及其性质.J1发酵液经60％硫酸铵沉淀，粗蛋白在pH值为6～8，温度为20～60°C等条件下均有较好的拮抗活性，且具有较宽的拮抗谱.经Econo-Pac Q离子交换柱纯化，得到一种表观分子量约为40ku拮抗蛋白JW.

摘要： 应用有关现代分子生物学新技术结合经典植物病理学、病原细菌学实验方法，获得了青枯病原细菌的三种致病相关胞外蛋白编码基因的克隆和亚克隆，进行了该基因所含核苷酸序列测定和同源性分析，同时还获得了控制青枯菌胞外蛋白输出细胞外膜的基因克隆和亚克隆，也进行了其核苷酸序列测定和同源性分析；表明它们与几种动植物病原细菌的分泌基因具较高同源性。成功地获得了马铃薯抗菌蛋白API编码基因的克隆，测定了核苷酸全序列，表明其与磷酸脂酶等抗逆性酶类具有较高同源性，已得到了该基因在大肠杆菌中的表达，成功地构建了该基因的植物表达载体，完成了该基因的外植体转化，首次获得了API编码基因的分子表达和抗青枯病表达的马铃薯植株。初步证明API可与数种马铃薯蛋白相互作用，其中包括叶绿体中的铁硫蛋白和果糖双磷酸醛羧酶。

摘要： 采用对峙生长法测定了24株红树内生细菌对芒果炭疽菌不同菌株的拮抗作用,其中来自老鼠簕(Acanthus ilicifolius)叶片的菌株AiL3拮抗效果较好,对芒果炭疽菌3个菌株的抑菌带均大于10mm.经形态观察、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析,将AiL3菌株初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).菌株培养滤液经有机溶剂萃取和硫酸铵沉淀分析发现,硫酸铵沉淀物具有抑菌活性,说明AiL3菌株产生的抗菌活性物质可能是蛋白类物质.该蛋白粗提液对芒果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)等8种植物病原菌均有较强的拮抗作用;对芒果炭疽病菌菌丝生长和分生孢子萌发的EC50分别为9.32μg/ml和5.81μg/ml,当提取物浓度为20.33μg/ml时,可导致芒果炭疽病菌分子孢子的消解.

摘要： 采用对峙生长法测定了24株红树内生细菌对芒果炭疽菌不同菌株的拮抗作用,其中来自老鼠簕(Acanthus ilicifolius)叶片的菌株AiL3拮抗效果较好,对芒果炭疽菌3个菌株的抑菌带均大于10mm.经形态观察、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析,将AiL3菌株初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).菌株培养滤液经有机溶剂萃取和硫酸铵沉淀分析发现,硫酸铵沉淀物具有抑菌活性,说明AiL3菌株产生的抗菌活性物质可能是蛋白类物质.该蛋白粗提液对芒果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)等8种植物病原菌均有较强的拮抗作用;对芒果炭疽病菌菌丝生长和分生孢子萌发的EC50分别为9.32μg/ml和5.81μg/ml,当提取物浓度为20.33μg/ml时,可导致芒果炭疽病菌分子孢子的消解.

摘要： 本发明涉及一种抗菌肽的制造方法，尤其涉及一种通过将抗菌肽遗传基因融合到在大肠杆菌中以不溶性形态表达的绿色荧光蛋白遗传基因并引进到大肠杆菌中进行表达之后再去除绿色荧光蛋白并收取抗菌肽的过程而批量地制造抗菌肽的方法。如上所述的本发明能够通过提供一种制造工程简单、经济性良好且生产收率较高的抗菌肽的制造方法，在因为多重耐药性微生物的急剧增加而急需开发出具有能够对上述耐药性菌株进行杀灭的全新作用机制的抗生素的制药以及饲料产业，提供能够替代现有的抗生素的天然抗生素。此外，本发明能够通过利用以酸处理方式切割氨基酸的方式替代现有的使用氰化溴的方式，在从不溶性蛋白纯化出目标蛋白质的过程中节省成本、降低工程的危险性并更快速地完成所需的作业。

摘要： 本发明涉及一种抗菌肽的制造方法，尤其涉及一种通过将抗菌肽遗传基因融合到在大肠杆菌中以不溶性形态表达的绿色荧光蛋白遗传基因并引进到大肠杆菌中进行表达之后再去除绿色荧光蛋白并收取抗菌肽的过程而批量地制造抗菌肽的方法。如上所述的本发明能够通过提供一种制造工程简单、经济性良好且生产收率较高的抗菌肽的制造方法，在因为多重耐药性微生物的急剧增加而急需开发出具有能够对上述耐药性菌株进行杀灭的全新作用机制的抗生素的制药以及饲料产业，提供能够替代现有的抗生素的天然抗生素。此外，本发明能够通过利用以酸处理方式切割氨基酸的方式替代现有的使用氰化溴的方式，在从不溶性蛋白纯化出目标蛋白质的过程中节省成本、降低工程的危险性并更快速地完成所需的作业。

摘要： 本发明具体涉及一种纳米抗菌再生蛋白纤维抗菌混纺面料的制备方法，步骤如下：表层制造：所述表层采用纳米抗菌再生蛋白纤维抗菌面料制成，所述纳米抗菌再生蛋白纤维抗菌面料采用经线和纬线互相交织而成，所述经线为纳米抗菌再生蛋白纤维和棉纤维的混纺纱，所述纬线为罗布麻纤维和棉纤维的混纺纱；中间层制造：所述第一面料层和第三面料层中罗布麻纤维与棉纤维先混纺，然后再与纳米抗菌再生蛋白纤维混纺，织造成布，所述第二面料层采用棉纤维纺纱制造而成，所述第一面料层、第二面料层和第三面料层依次通过点胶或针线缝合的方式贴合在一起；里层制造；贴合一体。本发明提供的一种纳米抗菌再生蛋白纤维抗菌混纺面料的制备方法，制备好的面料具有良好的纳米抗菌再生蛋白纤维抗菌功能，并且其制备工艺过程简单、易操作。

摘要： 本发明涉及一种基于蚕丝蛋白的抗菌结构色纤维的制备方法：将胶体微球分散于水中，制备质量分数为6‑15％的胶体乳液，胶体微球为聚苯乙烯微球、聚甲基丙烯酸甲酯微球和二氧化钛微球；将蚕丝蛋白、纤维素和稀土元素溶于碱的水溶液，静电纺丝后得到蚕丝蛋白纤维；将蚕丝蛋白纤维采用自下而上的提拉方式经过胶体乳液；将水分晾干。本发明还提供了一种基于蚕丝蛋白的抗菌结构色面料，包括：基布层及抗菌变色层，基布层由经纱和纬纱交织而成，每条纬纱均以倾斜的方式连接于相邻的两条经纱之间，经纱和纬纱至少其中的一种为包缠纱线，包缠纱线由蚕丝和麻类纤维组成，麻类纤维为芯纱，蚕丝包覆在麻类纤维表面，抗菌变色层由基于蚕丝蛋白的抗菌结构色纤维制成。

摘要： 本发明提供了一种具有抗幽门螺旋杆菌活性的抗菌肽以及包含该抗菌肽的融合蛋白，属于制药领域。该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该融合蛋白具有以下一级氨基酸序列结构：载体蛋白‑连接肽‑抗菌肽；其中，抗菌肽具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。这种抗菌肽具有抗幽门螺旋杆菌活性，且在胃环境中具有较强的稳定性和抗菌活性，其通过物理作用造成细胞膜的穿孔而达到抗幽门螺旋杆菌的效果，在使用过程中不容易使幽门螺旋杆菌产生耐药性。

摘要： 本发明提供了一种抗菌蛋白及分离的核酸、抗菌药物和应用，涉及生物技术领域，本发明提供的组蛋白H2A包括SEQ ID NO.1～12所述的组蛋白中的一种或多种，其能高效、安全、便捷地抑制细菌的感染，并具有免疫调节的功能；其可用于抗菌药物和免疫增强剂等领域。

摘要： 本发明提供一种从白蚁中提取抗菌蛋白质的方法，包括以下步骤：称取白蚁粉末置于索氏提取器中，加入有机溶剂进行抽提以脱除所述白蚁粉末中的脂肪，经干燥后得到脱脂白蚁粉末；将所述脱脂白蚁粉末置于体积分数50～70％乙醇中进行浸提，分离后得到浸提液，蒸去所述浸提液中的乙醇后得到粗提液；利用串联柱层析色谱对所述粗提液进行分离纯化，得到提取液；利用抑菌实验对所述提取液进行筛选，得到所述抗菌蛋白质，本发明还提供了利用所述方法提取的抗菌蛋白质。本发明所述提取方法利用串联柱层析色谱法原理对提取的蛋白质进行分离，具有设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高的优点。

摘要： 本发明提供了一种抗菌蛋白、核苷酸、表达载体、抗菌产品及其应用，属于生物技术领域，该抗菌蛋白能快速、安全、有效地预防和/或抑制病原菌，尤其是柱状黄杆菌。同时本发明的抗菌蛋白gcH2A‑11和gcH2A‑16能有效激活草鱼的免疫反应，显著增强草鱼对柱状黄杆菌感染的抵制。因此，本发明的抗菌蛋白还能作为免疫增强剂和抗菌产品同时使用，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种抗菌蛋白及分离的核酸、抗菌药物和应用，涉及生物技术领域，本发明提供的组蛋白H2A包括SEQ ID NO.1～12所述的组蛋白中的一种或多种，其能高效、安全、便捷地抑制细菌的感染，并具有免疫调节的功能；其可用于抗菌药物和免疫增强剂等领域。

摘要： 本发明属于复合胶粘剂的技术领域，提供了一种含抗菌蛋白的抗菌水溶性包装复合胶粘剂及制备方法。该方法采用水溶性丙烯酸类胶粘剂、抗菌蛋白、壳聚糖填料、橙皮萃取物、交联剂、成膜剂及水制得抗菌水溶性包装复合胶粘剂。与传统方法相比，本发明的制备的复合胶粘剂，固化速率快，粘结强度高，粘结力稳定，并且通过添加抗菌蛋白，显著提升了胶粘剂的抑菌能力，使用中不易霉变，性能稳定，安全性好，适用于书刊等的装订。