miR-34a/ATG4 B对db/db小鼠肾脏损伤中自噬和氧化应激的影响

摘要

目的 探讨miR-34a/自噬相关基因(ATG)4B对2型糖尿病(db/db)小鼠肾脏损伤中自噬和氧化应激的影响.方法 将30只4周龄健康雄性db/db小鼠适应性喂养2周,后采用随机数字表法将其分为5组:模型组(无任何干预)、miR-34a激动剂组(尾静脉注射miR-34a激动剂,首次20 nmol,维持剂量每3天5 nmol)、miR-34a激动剂对照组(尾静脉注射miR-34a激动剂阴性对照物,方法剂量同激动剂)、miR-34a拮抗剂组(尾静脉注射miR-34a拮抗剂,首次200 nmol,维持剂量每3天50 nmol)、miR-34a拮抗剂对照组(尾静脉注射miR-34a拮抗剂阴性对照物,方法剂量同拮抗剂),每组6只;同时选取6只6周龄健康雄性db/m小鼠作为正常对照组(无任何干预).4周后检测空腹血糖、血脂、尿白蛋白、肾脏组织中ATG4B、自噬标记蛋白[微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ和p62]和氧化应激水平[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧类(ROS)].结果 10周龄时,模型组小鼠的体重、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油水平及尿蛋白/尿肌酐比值以及肾脏miR-34a、p62蛋白、MDA和ROS水平均高于对照组,但ATG4B、LC3Ⅱ、SOD水平低于对照组(P<0.01).miR-34a激动剂组、miR-34a拮抗剂组与模型组小鼠血糖和糖化血红蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),但miR-34a激动剂组尿白蛋白/尿肌酐比值明显高于模型组,而miR-34a拮抗剂组尿白蛋白/尿肌酐比值明显低于模型组(P<0.01).miR-34a激动剂组小鼠肾脏ATG4B、LC3Ⅱ、SOD水平低于激动剂阴性对照组,而p62、MDA和ROS水平高于激动剂阴性对照组(P<0.01);miR-34a拮抗剂组小鼠肾脏ATG4B、LC3Ⅱ、SOD水平高于拮抗剂阴性对照组,而p62蛋白表达水平低于拮抗剂阴性对照组(P<0.01).结论 miR-34a通过下调糖尿病小鼠肾脏中ATG4B蛋白表达抑制自噬和诱导氧化应激,导致肾脏损伤.