脑胶质瘤细胞外泌体对血管新生的影响及其机制

摘要

目的探讨脑胶质瘤细胞外泌体对血管新生的影响及其机制。方法差速离心法提取人脑胶质瘤细胞U373和U87以及脑胶质细胞HEB所分泌的外泌体,透射电镜观察外泌体结构,Western blot鉴定外泌体标志蛋白;将0.2μg/μL的外泌体和等体积PBS分别与人脐静脉内皮细胞HUVECs共孵育,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力,小管形成实验检测体外血管生成,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blot检测凋亡蛋白Bax、Caspase3、Caspase9、VEGF、VEGFR2的表达及AKT的磷酸化水平。结果提取的外泌体符合其特征;相比于PBS组,与HEB-exo共孵育后,HUVECs增殖、迁移、小管形成、细胞凋亡均无显著变化(P>0.05);而与U373-exo和U87-exo共孵育后HUVECs增殖、迁移、小管形成能力均显著提高(P<0.05);细胞凋亡水平显著降低(P<0.001),Bax、Caspase3、Caspase9表达显著下降(P<0.001),VEGF、VEGFR2的表达以及AKT的磷酸化水平显著提高(P<0.001)。结论脑胶质瘤细胞外泌体能够激活调控VEGF/AKT信号通路而促进血管新生。