实时荧光定量PCR HBV-DNA检测系统性能验证方法的探讨

摘要

目的 探讨实时荧光定量PCR HBV-DNA检测系统的性能验证方法.方法 根据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)有关要求,并参照美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)相关EP文件,对本实验室HBV-DNA检测系统的性能验证方法进行试验设计,采用实时荧光定量PCR方法对临床血清标本进行检测.结果 低、高两个浓度水平的重复性精密度(CV批内)分别为1.47％、0.79％,中间精密度(CV批间)分别为2.09％、0.995％.标准定值血清测量值的对数与认定值偏差均≤±0.4.线性范围验证的回归方程为y=1.005x-0.2633,R2=0.9991(P＜ 0.01),范围为(1× 102～5×109)IU/ml.检测下限为100 IU/ml.结论 本实验室HBV-DNA检测系统性能符合要求,设计的性能验证方法可行性好,可为建立有关系统性能验证的标准化操作规程(SOP)提供参考依据.