槐耳对人急性T淋巴细胞白血病CEM-C1细胞耐药性的逆转作用及机制

摘要

目的 探讨槐耳能否逆转人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株CEM-C1细胞对糖皮质激素的耐药性及其可能的机制.方法 人CEM-C1、CEM-C7细胞经不同浓度槐耳处理后设为对照组(0μg/ml)及200、600μg/ml槐耳处理组,T-ALL细胞株CEM-C1细胞设槐耳(100μg/ml)联合地塞米松(DEX,12.5、25、50、100、200μg/ml)组.CCK-8法检测槐耳对各组细胞增殖的影响;流式细胞术检测不同浓度(200、600μg/ml)槐耳对CEM-C1、CEM-C7细胞凋亡及细胞周期的影响;Western blotting检测CEM-C1、CEM-C7细胞中及CEM-C1细胞经不同浓度(200、600μg/ml)槐耳处理后MDR1、Pim3蛋白的表达水平;qRT-PCR检测CEM-C1、CEM-C7细胞中及CEM-C1细胞经不同浓度(200、600μg/ml)槐耳处理后Pim3 mRNA的表达情况.结果 槐耳呈剂量依赖性地抑制CEM-C1、CEM-C7细胞增殖;在CEM-C1细胞中,与单用DEX比较,槐耳联合DEX的耐药逆转倍数为1.34倍,且槐耳联合低浓度DEX(12.5、25、50μg/ml)组CEM-C1细胞的增殖抑制率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);槐耳联合DEX各组的两药相互作用指数(CDI)均<1.与对照组比较,CEM-C1及CEM-C7细胞凋亡率随槐耳浓度的增加而升高,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,200、600μg/ml槐耳处理CEM-C1、CEM-C7细胞48 h后,S期细胞比例增加,G0/G1期细胞比例降低,差异有统计学意义(P<0.05).CEM-C1细胞中MDR1、Pim3蛋白表达水平(分别为2.41±0.32、0.39±0.10)及Pim3 mRNA表达水平(1.00)均明显高于CEM-C7细胞(分别为1.34±0.43、0.13±0.05及0.37±0.02),差异有统计学意义(P<0.05);CEM-C1细胞经200、600μg/ml槐耳处理后,MDR1、Pim3蛋白及Pim3 mRNA表达水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 槐耳可抑制CEM-C1、CEM-C7细胞的增殖,促进其凋亡,并可部分逆转CEM-C1细胞对糖皮质激素的耐药性,其机制可能与Pim3下调有关.