锶对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响

摘要

目的 观察锶(Sr)对人骨髓问充质干细胞(hMSCs)增殖及成骨分化的影响并探索其最佳作用浓度.方法 抽取健康成年志愿者骨髓6ml,体外分离、培养原代hMSCs,流式细胞术鉴定细胞表型.取第4代细胞进行实验,共分为5组,A组为空白对照,培养液中仅加入骨诱导剂(地塞米松10~(-8) mol/L、抗坏血酸50μg/ml、β-甘油磷酸钠10mmol/L,B、C、D、E组培养液在加入骨诱导剂后分别加入3.75×10~(-3) 、3.75×10~(-2)、3.75×10~(-1)、3.75mmol/L的SrCl_2.定期测定各组hMSCs的增殖情况(MTT法)、碱性磷酸酶(ALP)活性(酶标法)和骨钙素(OCN)含量(放免法),并观察细胞茜素红钙结节染色情况,分析各组钙结节数量及面积.结果 随培养时间延长,各组细胞增殖和成骨分化均明显提高(P＜0.01).组问比较显示,第7天时的细胞增殖水平,第7、14天的ALP活性,第14、21天的OCN含量以及第21天的茜素红钙结节数量和面积测定结果,B-E组均明显优于A组(P＜0.05);D、E组第7天时的细胞增殖水平及第14天的ALP活性均明显高于A、B、C组(P＜0.05),而D组与E组比较无显著差异(P＞0.05);第21天时的OCN含量以及茜素红钙结节数量和面积测定结果D组均高于与其他4组(P＜0.05).结论 锶可促进hMSCs的增殖及成骨分化,其最佳作用浓度为3.75×10~(-1) mmol/L.