miR-200b靶向调控PKCα表达对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

摘要

目的 观察miR-200b能否通过靶向凋控蛋白激酶Cα(PKCα)的表达而抑制胶质瘤细胞的增殖及侵袭能力,探讨miR-200b的抑瘤分子机制.方法 构建PKCα3'-UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶活性检测观察miR-200b对PKCα 3'-UTR-荧光素酶活性的影响.将miR-200b模拟物转染胶质瘤细胞U87,采用Western blotting检测PKCα表达水平.将PKCα siRNA转染U87细胞,通过MTS法和Transwell侵袭实验观察细胞生长和侵袭能力的变化.结果 双荧光素酶检测显示,miR-200b能特异性地与PKCα mRNA的3’-UTR结合,抑制其荧光素酶活性.过表达miR-200b的U87细胞PKCαmRNA及蛋白表达水平降低.siRNA干扰PKCα表达可抑制U87细胞的增殖和侵袭能力.结论 miR-200b可通过靶向调控PKCα的表达而抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力.