体外构建组织工程皮肤修复Ⅲ度烫伤切痂创面的实验研究

摘要

目的 观察体外构建的组织工程皮肤修复大鼠Ⅲ度烫伤切痂创面的可行性和效果.方法 酶消化法获取SD乳鼠表皮细胞和成纤维细胞(Fb)后进行体外培养,同时用高渗盐水/氢氧化钠法制备无细胞毒性猪去细胞真皮基质(PADM),然后将Fb与Ⅰ型牛胶原混合种植于PADM的表面,以SD乳鼠的第3代表皮细胞种植在真皮基质胶原面获取组织工程皮肤,以SD乳鼠的第3代表皮细胞制备表皮细胞膜片.对48只SD大鼠Ⅲ度烫伤切痂创面分别行组织工程皮肤移植(实验组)和单纯表皮细胞膜片移植(对照组),术后行大体观察和组织学观察,比较各组创面愈合率、收缩率.抗CD34单克隆抗体免疫组化染色标记血管内皮细胞后行创面微血管计数,抗Laminin免疫组化染色观察基底膜中层黏连蛋白的表达情况.结果 两组创面术后均未见对移植物的急性期免疫排斥反应,第2、4、6周实验组移植物成活率分别为75.05％±3.69％、83.12％±3.13％、92.03％±3.87％,与对照组(分别为77.63％±3.23％、83.17％±3.92％、91.09％±3.35％)比较差异无统计学意义(P＞0.05).术后第2、4、6周实验组移植物收缩率分别为9.13％±2.27％、18.52％±3.40％、23.92％±3.01％,明显低于对照组(分别为14.21％±3.05％、29.12％±3.02％、39.78％±3.42％,P＜0.05).术后6周实验组基底膜结构清晰、连续,对照组基底膜区模糊、不连续.第4、6周后实验组微血管数目分别为37.5±3.9、46.9±3.5个/HP,明显高于对照组(分别为23.0±2.0、27.5±2.7个/HP,P＜0.05).结论 以Fb-胶原-PADM活性复合真皮基质为载体,与表皮细胞构建的组织工程皮肤,适用于修复Ⅲ度烫伤切痂创面,能改善创面愈合质量.