外源性PTEN cDNA对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的 探讨外源性野生型PTEN cDNA对人子宫内膜癌细胞RL95-2增殖、克隆形成和凋亡的影响.方法 脂质体介导携带野生型PTEN cDNA的质粒pcDNA3.0-PTEN cDNA转染人子宫内膜癌细胞RL95-2;G418筛选被转染的细胞株并扩增培养;RT-PCR方法检测PTEN cDNA在RL95-2细胞中的表达,并以转染空载体及未转染的RL95-2为对照组.四唑盐(MTT)比色实验检测细胞增殖活力,软琼脂克隆形成实验检测转染后细胞的克隆形成率,透射电镜观察细胞形态.结果 G418筛选得到稳定表达细胞株;RT-PCR方法检测PTEN cDNA在RL95-2细胞中持续表达.转染PTEN cDNA组的细胞培养24 h、48 h、72 h和96 h后A490值明显低于转染空载体组(P<0.01),而转染空载体组的A490值与未转染组比较无明显差异(P＞0.05);转染PTEN cDNA组细胞克隆形成数与转染空载体组之间相比有显著性差异(P<0.01),而转染空载体组与未转染组之间相比没有显著性差异(P>0.05);转染PTEN cDNA组透射电镜下出现肿瘤细胞凋亡表现,而转染空载体组细胞超微结构未见异常.结论 PTEN cDNA稳定表达可明显抑制RL95-2细胞的体外增殖、克隆形成并诱导细胞凋亡.