人源CBX7功能结构域的重组表达与纯化

摘要

CBX7 (chromobox 7)在细胞寿命延长和癌症发生中起着重要的调控作用.然而,获取足量的全长CBX7蛋白并用于结构研究极为艰难.实验阐述了CBX7功能结构域CBX7 (aa 145～227)重组表达载体构建的详细过程.同时,通过Ni-NTA亲和层析对融合目的蛋白进行了纯化,并利用SDS-PAGE及Western-blot进行了鉴定分析.纯化后的融合蛋白样品通过离子交换和分子筛层析进一步分离剩余杂质.本实验得到的高浓度CBX7蛋白可用于结晶,为后续CBX7的结构和功能研究奠定了基础.