固氮基因nifHDK启动子的功能在大肠杆菌中的验证

摘要

近年来,在对肺炎克氏杆菌（Klebsiella pneumoniae）nifA产物研究的基础上已建立了固氮基因调控的模型。固氮基因（nif）的表达受氮调节系统ntr和nifAL操纵子的两个系统的调控。本实验将固氮基因nifHDK启动子、aphA-6基因和rbcL3＇构建aphA-6基因表达盒,克隆到pSK.KmR载体,将其转入到大肠杆菌中验证nifHDK启动子的表达活性。结果表明,只有在转入外源nifA基因时,nifHDK启动子才具有转录活性,aphA-6基因才能表达。验证了NifA蛋白和σ54因子是固氮基因的正向调节蛋白,为下一步固氮生物工程研究提供了理论基础。