登革2型病毒43株prM基因片段在痘苗中的克隆与表达

摘要

利用RT-PCR技术获得登革2型病毒中国分离株（D2-43）的prM基因片段。扩增产物经酚:氯仿抽提纯化之后,直接插入pT7BlueT载体中,经DNA序列分析证明了所扩增片段序列的正确性。构建了痘苗病毒载体PJSA1175/prM,外源基因受痘苗病毒启动子P7.5K的调控。脂质转染（Lipofection）法获得D2-43株prM蛋白的重组病毒。荧光检测显示,重组痘苗病毒表达的prM蛋白分布于细胞表面。间接ELISA测定其滴度为1:4。