雌激素受体β表达载体的构建及其转录活性测定

摘要

为探索雌激素受体β(ERβ)在乳腺癌形成过程中的分子机制,构建出带HA标签的ERβ真核表达载体.首先将PCR扩增出的带HA标签的DNA片段连接到pcDNA3载体中,得到重组质粒pcDNA3-HA.再将ERβ完整编码区序列克隆到pcDNA3-HA中,得到重组质粒pcDNA3-HA-ERβ.Western印迹结果表明,转染pcDNA3-HA-ERβ重组质粒的293T细胞表达了与预期大小一致的HA-ERβ.用含雌激素应答元件的报告基因系统检测ERβ的转录活性表明,HA-ERβ在293T细胞中的表达激活了报告基因的表达.ERβ表达载体的成功构建为深入研究其生物学功能打下了坚实的基础.