端粒、端粒酶结合因子hPinxl基因启动子的克隆及活性分析

摘要

目的:克隆端粒、端粒酶结合因子hPinx1基因的启动子,分析并鉴定其活性调控元件.方法:采用PCR技术从人肝癌细胞系HepG2基因组中扩增出hPinx1启动子,构建到萤光素酶报告基因载体pGL3-basic中,确定所扩增的DNA序列,在HepG2细胞中检测其活性.结果:克隆了hPinx1基因转录起始位点上游4661bp且序列正确;活性分析表明hPinx1启动子含有多个调控元件,其中核心序列位于530bp内,在1329～2174bp间存在正调控序列,在2174～4661bp间存在负调控序列.结论:构建的hPinx1启动子具有活性,为hPinx1的功能研究提供了重要基础.