人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因启动子的克隆及其在喉癌基因治疗中的意义

摘要

本文通过提取人HeLa细胞的基因组，利用PCR技术克隆hTERT基因的核心启动子，将其插入荧光素酶报告载体中，转染肿瘤细胞及正常细胞，观察两种细胞中荧光素酶基因表达的差异；以含有HSV-tk基因cDNA全长的质粒pBluescript-tk为模板扩增出tk基因，在tk基因两端加入Xba Ⅰ和Nco Ⅰ酶切位点，将tk基因连接于hTERT核心启动子的下游，转染喉癌细胞系Hep-2和正常肝细胞系7702，利用RT-PCR检测tk基因的表达。实验结果显示：hTERT基因的启动子具有肿瘤细胞特异性，由其调控的tk基因有可能解决喉癌基因治疗中存在的非特异性杀伤的问题。

目录

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资助

缩略语表

前言

文献回顾

1实验设计

1.1研究意义

1.2研究目的

1.3研究方法

1.4研究任务

2实验研究

2.1人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子的克隆及其活性鉴定

2.1.1主要仪器

2.1.2材料

2.1.3主要试剂

2.1.4方法

2.1.5结果

2.1.6讨论

2.2 hTERT基因启动子调控HSV-tk基因表达的检测

2.2.1主要仪器

2.2.2材料

2.2.3主要试剂

2.2.4方法

2.2.5结果

2.2.6讨论

2.3小结

参考文献

个人简历和研究成果

致 谢