初探酶联免疫斑点法检测T细胞免疫功能质控要点

摘要

恶性肿瘤逐渐成为影响人类健康的主要因素，在传统治疗手段的基础上，人们开始关注免疫功能在疾病发生过程中的变化情况，而肿瘤细胞在人体中的免疫反应主要以细胞免疫为主，如何高效、准确地检测特异性细胞免疫功能的变化成为研究的热点［1］。在诸多的免疫检测方法中，酶联免疫斑点法（ELISPOT）由于其灵敏度高、特异性强、操作简便而受到重视。该方法可以有效检测特异性抗体分泌细胞的数量和功能，可以在单细胞水平测定分泌特定细胞因子的功能和细胞数量，广泛应用于人类免疫缺陷病毒疫苗、病毒感染相关疾病及肿瘤等方面的研究中［2‐5］。目前本实验室应用ELISPOT 技术检测 EB 病毒（EBV）感染的鼻咽癌患者放射治疗前后特异性T 细胞免疫功能的变化情况，筛选特定的多肽，并致力于为生物治疗提供临床依据，已经取得初步的结果［6‐7］。由于ELISPOT 技术的高敏感性，实验的结果容易受到诸多因素的影响，为了得到真实、准确的结果，严格规范实验流程，加强实验室的质量控制是确保实验结果的关键。经过近年来对ELISPOT 技术的应用及总结，现将ELISPOT 技术的质控要点总结如下。