IL-4,GM-CSF体外诱导猪单核来源树突状细胞和功能鉴定

摘要

目的 探讨体外大量培养扩增猪外周血单核细胞来源DC(monocyte-derived DC,MoDC),对细胞表型,免疫学功能及生物学活性进行鉴定.方法提取猪外周血单核细胞(PBMC),经GM-CSF和IL-4诱导,体外培养5～8d,得到悬浮的MoDC,培养第5天加入浓度为1μg/ml的LPS诱导成熟.通过倒置相差显微镜下观察MoDC细胞形态,流式细胞术检测表面CD80/86,SLA-Ⅱ,CD172a等分子表达,BrdU法测定混合淋巴细胞培养MoDC对同种异体T细胞的刺激能力,ELISA法检测MLR上清液中IFN-γL-4水平.结果 IL-4/GM-CSF刺激猪PBMC,可以获得MoDC,其表型为CD1+CD14+CD172a+CD80/86+SLA-Ⅱ+,经LPS刺激后CD80,CD86,SLA-Ⅱ表达升高.结论 应用细胞因子诱导猪PBMC成功获得了MoDC,为今后进一步研究移植耐受诱导和应用于异种移植打下基础.