氯苯甲嗪减轻顺铂导致小鼠背根神经节神经元的损伤

摘要

目的研究氯苯甲嗪(Meclizine)对顺铂(DDP)造成的神经细胞损伤的保护作用。方法取成年昆明小鼠脊椎背根神经节(DRG)神经元原代培养,24 h后使用NF200、γH_2AX和Polκ抗体进行免疫荧光染色观察对照组(Control)、顺铂损伤组(20μmol/L DDP)和氯苯甲嗪预处理组(5μmol/L Meclizine+20μmol/L DDP)的细胞形态和DNA损伤程度;用TUNEL凋亡检测试剂盒检测三个组细胞凋亡水平。结果免疫荧光显微镜下观察到,与对照组相比,顺铂损伤组神经元神经丝明显缩短,细胞数量明显减少,并且被γH2AX标记的DNA损伤位点荧光强度明显增强,表明其存在较严重损伤,通过荧光染色亦观察到细胞核内负责DNA修复的聚合酶Polκ的水平上升。与顺铂损伤组相比,氯苯甲嗪预处理组的神经细胞神经丝长度较长,DNA损伤位点荧光强度较弱(P<0.05),且Polκ荧光强度同样较弱(P<0.05)。与对照组相比,顺铂损伤组细胞出现较明显的凋亡小体,细胞凋亡率最高(P<0.05),而氯苯甲嗪预处理组未见凋亡小体,细胞凋亡率较顺铂损伤组低(P<0.05),与对照组无差异。结论顺铂会影响DRG神经元生长,促进DRG神经元凋亡,而氯苯甲嗪预处理可以减轻由顺铂造成的DRG细胞损伤,也可降低由顺铂导致的细胞凋亡。