重叠区扩增基因拼接法在构建膜锚定金黄色葡萄球菌肠毒素A融合基因上的应用

摘要

目的:将超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因与人胎盘碱性磷酸酶(hPLAP-1)C末端信号肽序列进行拼接,形成融合基因.方法:利用重叠区扩增基因拼接法,分别扩增hPLAP-1 C末端信号肽序列和SEA基因序列.然后,将二段基因拼接并与pGEM-T克隆载体连接,酶切和测序鉴定.结果:成功扩增出hPLAP-1 C末端信号肽序列131 bp和SEA基因序列796 bp;经测序证实,二段基因序列成功拼接(901 bp).结论:重叠区扩增基因拼接法能将SEA基因与hPLAP-1C末端信号肽序列拼接,形成融合基因.