桃ACC氧化酶cDNA片段扩增及其克隆和鉴定(英文)

摘要

采用“富集ＰＣＲ”方法，用单个特异引物和ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５从桃伤处理叶片ｃＤＮＡ 中扩增出特异性片段⒚将扩增产物分离并克隆筛选到１３ 个重组克隆，其中有６ 个克隆能与ＡＣＣ氧化酶基因组ＤＮＡ 杂交，对其中一个阳性克隆ｐＧＥＭＡＣ１２ 作酶切分析，发现其酶切图谱与已报道的桃果实成熟相关的ＡＣＣ氧化酶ｃＤＮＡ 基本一致⒚ＤＮＡ 序列分析表明，插入片段两端ＤＮＡ 序列均是 ５＇端特异引物序列，表明是由５＇端特异引物单个引物扩增出来，全序列分析表明插入片段全长８３３ ｂｐ，是ＡＣＣ 氧化酶ｃＤＮＡ 基因编码区的一部分，５＇端缺少启始密码子ＡＴＧ。