雷帕霉素缓解奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的作用机制

摘要

乳腺炎是泌乳奶牛的常见疾病,每年给养殖企业造成巨大的经济损失。本研究采用不同浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导奶牛乳腺上皮细胞的炎症反应,之后,在对照培养基(CK)基础上分别添加100μg/mL LPS(LPS_(100))、10 mmol/L雷帕霉素(RAP_(10))及2种物质联合添加(LPS_(100)+RAP_(10))并处理细胞24 h,结束后收集细胞及上清液用于后续测定。结果表明:在不改变细胞活力和凋亡的情况下,添加100μg/mLLPS显著提高了上清液中白介素-8(interleukin-8,IL-8)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)的浓度(P0.05),但10 mmol/L雷帕霉素处理显著降低了LPS诱导的IL-1β和TNF-α分泌量(P<0.05)。LPS提高了核因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)通路中p65蛋白的磷酸化水平,但雷帕霉素的添加消除了这种提高作用(P<0.05)。与LPS_(100)组相比,LPS_(100)+RAP_(10)处理降低了奶牛乳腺上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)通路中c-JunN末端激酶(c-JunN-terminalkinase,JNK)和p38蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。综上所述,雷帕霉素通过NF-κB/MAPK通路缓解了LPS引起的乳腺上皮细胞炎症反应,该结果可为雷帕霉素用于乳腺炎的治疗提供理论参考。