虫草益肾颗粒对高糖条件下肾小球系膜细胞氧化应激及p22phox表达的影响

摘要

[目的]研究虫草益肾颗粒对高糖环境下人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)氧化应激及p22phox表达水平的影响,探讨其防治糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的作用机制。[方法]将50只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级Wistar大鼠随机分为正常组,福辛普利组,虫草益肾颗粒低、中、高剂量组,每组10只。以细胞增殖检测(cell counting kit-8,CCK-8)法检测HMCs在24、48、72 h的细胞增殖情况;分别于48、72 h时,以流式细胞术检测各组HMCs的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;以免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)法检测各组p22phox的表达情况。[结果] HMCs经高糖培养后增殖明显,48 h时的增殖率最高,随后便进入增殖平台期,增殖速度逐渐趋于平缓。各给药组对高糖培养下的HMCs的增殖均有抑制作用(P<0.01),且虫草益肾颗粒对HMCs增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性关系。与正常组比较,48、72 h时各组细胞ROS水平均增高(P<0.05),p22phox的mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.01)。与高糖组比较,福辛普利组、虫草益肾颗粒低、中、高剂量组细胞的ROS水平、p22phox的m RNA及蛋白表达量均明显下降(P<0.05或P<0.01)。[结论]虫草益肾颗粒可能是通过抑制p22phox基因转录,下调p22phox蛋白表达来减少细胞内ROS的生成,从而减轻氧化应激反应,延缓DKD发生发展。