小麦锈菌AFLP分子标记技术体系的建立

摘要

以小麦条锈菌、杆锈菌、叶锈菌的夏孢子为材料,通过DNA提取、酶切、PCR扩增、凝胶电泳等系列程序摸索和优化,建立了锈菌的AFLP分子标记体系如下:40μL酶切体系中采用了EcoR I,Tru lI各5U,37℃3 h,65℃3h双酶切4μL 100 ng/μL的DNA;然后加入10μL连接混合液22℃连接3 h,16℃10 h;连接产物5μL,10μmol/LEcoR I,10μmol/LTru1 I预扩引物各1.5μL,PCR反应液25μL,ddH2O 17μL进行预扩;预扩产物稀释20倍后取5μL,50 ng/μL EcoR I,Tru1 I选扩引物各1μL,PCR反应液10μL,ddH2O 3μL体系进行选择性扩增。为研究小麦锈病和其他真菌性病害的分子标记克隆及抗病育种的辅助选择提供了有力工具。