版纳微型猪近交系成纤维细胞系的建立及冻存方法研究

摘要

本试验旨在观察胶原酶对版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line,BMI）耳组织的消化效果,探讨不同冻存方法对耳组织成纤维细胞存活率的影响.用胶原酶Ⅳ消化法培养BMI 60日龄仔猪原代耳组织成纤维细胞,建立耳组织成纤维细胞系,比较-80℃条件下分别保存3,5,7,30 d后冻存效果.结果表明：BMI仔猪成纤维细胞具有典型的成纤维细胞特征;生长曲线呈“S”形,倍增时间为37.1h;-80℃冻存3,5,7d的成纤维细胞存活率与液氮保存（93.74％）差异不显著（P＞0.05）,冻存30 d的存活率（79.38％）显著低于其他各组（P＜0.05）,但经48 ～ 72 h培养后仍能贴壁生长.因此,可得出此结论：采用胶原酶Ⅳ消化法可消化BMI耳组织成纤维细胞,而且该细胞在-80℃条件下能进行短期保存.