p70s6k-siRNA在顺铂耐药胃癌细胞中的作用

摘要

目的 探讨p70s6k-siRNA在顺铂(DDP)耐药胃癌细胞株SGC7901/DDP中的作用及机制.方法 MTT法检测各组胃癌SGC7901/DDP细胞(对照组、p70s6k-siRNA转染组、DDP组及p70s6k-siRNA+DDP联合作用组)24、48、72 h增殖情况;免疫细胞化学染色及Western blot检测各组细胞中P-gp、MRP1、p-JNK蛋白的表达情况;RT-PCR检测各组细胞GST、MRP1mRNA的表达水平;测定各组细胞内谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽S-转移酶(GST)活力.结果 转染组对SGC7901/DDP细胞增殖的抑制作用与对照组相比差异有统计学意义;联合作用组对SGC7901/DDP细胞增殖的抑制作用与对照组及转染组相比差异均具有统计学意义.免疫细胞化学及Western blot检测结果均显示与对照组相比较,转染组及联合作用组细胞P-gp、MRP1、p-JNK蛋白的表达下降.RT-PCR结果显示与对照组相比较,转染组及联合作用组细胞GST和MRP1的mRNA表达均下降.转染组细胞中GSH含量下降和GST活力下降,与对照组相比差异具有统计学意义;联合作用组细胞中GSH含量下降和GST活力下降,与对照组及转染组相比差异均具有统计学意义.结论 p70s6k-siRNA转染SGC7901/DDP细胞可以抑制细胞增殖,联合顺铂具有协同作用.p70s6k-siRNA可通过下调GSH含量和GST活力及下调相关耐药蛋白P-gp、MRP1、p-JNK的表达发挥作用.