5-氮杂-2'-脱氧胞苷对宫颈癌细胞增殖及N-ras、c-myc基因表达的影响

摘要

目的 探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对宫颈癌细胞增殖及N-ras、c-myc基因表达的影响.方法 取对数生长期宫颈癌Hela细胞随机分为对照组、低剂量5-Aza-CdR组、中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组,分别给予终浓度为0、1、5、10μmol·L-1的5-Aza-CdR进行干预,采用四甲基偶氮唑盐法检测干预24、48、72、96 h时Hela细胞增殖能力,流式细胞仪检测干预24 h时Hela细胞凋亡率,免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应法检测干预24 h时Hela细胞N-ras、c-myc蛋白及mRNA水平,酶联免疫吸附法检测干预24 h时Hela细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)及前列腺素E2(PGE2)水平.结果 干预24 h时,各组Hela细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);干预48、72、96 h时,低剂量5-Aza-CdR组、中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组Hela细胞增殖能力均显著低于对照组(P<0.05),高剂量5-Aza-CdR组Hela细胞增殖能力显著低于低剂量5-Aza-CdR组和中剂量5-Aza-CdR组(P<0.05);干预72、96 h时,中剂量5-Aza-CdR组Hela细胞增殖能力显著低于低剂量5-Aza-CdR组(P<0.05).低剂量5-Aza-CdR组、中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组Hela细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);低剂量5-Aza-CdR组Hela细胞凋亡率显著低于中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组(P<0.05);中剂量5-Aza-CdR组Hela细胞凋亡率显著低于高剂量5-Aza-CdR组(P<0.05).低剂量5-Aza-CdR组、中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组Hela细胞中N-ras及c-myc蛋白和mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05);低剂量5-Aza-CdR组Hela细胞中N-ras及c-myc蛋白和mRNA相对表达量显著高于中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组,中剂量5-Aza-CdR组Hela细胞中N-ras及c-myc蛋白和mRNA相对表达量显著高于高剂量5-Aza-CdR组(P<0.05).低剂量5-Aza-CdR组、中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组Hela细胞上清液中TGF-β1水平显著高于对照组,PGE2水平显著低于对照组(P<0.05);低剂量5-Aza-CdR组Hela细胞上清液中TGF-β1水平显著低于中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组,PGE2水平显著高于中剂量5-Aza-CdR组及高剂量5-Aza-CdR组(P<0.05);中剂量5-Aza-CdR组Hela细胞上清液中TGF-β1水平显著低于高剂量5-Aza-CdR组,PGE2水平显著高于高剂量5-Aza-CdR组(P<0.05).结论 5-Aza-dc能够通过下调N-ras、c-myc基因表达抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与TGF-β1水平升高、PGE2水平降低相关.