ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪最佳反应体系探讨

摘要

目的 探讨ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的最佳反应体系,使DNA序列测定高效且经济.方法 运用含有重组质粒的饱和大肠杆菌E. coli菌液,采取碱裂解法提取质粒.依据测序原理,分别通过调整模板量、BigDye Mix的用量和反应体系的体积来确定ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的最佳反应条件.结果 针对该样本,测定DNA序列的最佳反应体系为:模板量100 ng,BigDye Mix 2 μL,引物1.6 pmol,双重蒸馏水补足总体积为10 μL.结论 该反应体系保证了ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的测序质量,且大大节约了成本.