高糖高脂环境下尿石素A对MIN6胰岛β细胞形态活力影响及分子机制初探

摘要

目的研究高糖高脂环境下尿石素A(UA)对MIN6胰岛β细胞形态、活力的影响,通过UA与糖尿病靶点蛋白进行分子对接预测其作用机制。方法体外培养小鼠MIN6胰岛β细胞株,分别用高糖(葡萄糖25 mmol/L)、高脂(棕榈酸0.5 mmol/L)、高糖高脂(25 mmol/L葡萄糖联合0.5 mmol/L棕榈酸)处理24 h建立细胞损伤模型,观察不同浓度UA(1.4、2.9、5.8、11.5、23.0μg/mL)对MIN6胰岛β细胞形态活力的影响。将3种模型细胞分别用UA(11.5μg/mL)干预12、24、48、72 h,光学显微镜观察细胞形态变化,CCK8法检测细胞活力。采用Molecular Docking(分子对接)法考察UA与腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)等糖尿病核心靶点的结合能力。结果与正常组比较,高糖、高脂或高糖高脂干预24 h可引起MIN6胰岛β细胞损伤,细胞活力下降细胞形态改变,差异有统计学意义(P<0.01)。与高糖模型组比较,UA(23.0μg/mL)浓度组细胞活力显著增强,差异有统计学意义(P<0.01)。与高脂模型组比较,UA(5.8、11.5μg/mL)浓度组的细胞活力显著增强,差异有统计学意义(P<0.01)。与高糖高脂模型组比较,UA(5.8、11.5、23.0μg/mL)浓度组细胞活力显著增强,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,高糖处理24、48、72 h,高脂、高糖高脂处理12、24、48、72 h,MIN6胰岛β细胞活力显著下降;11.5μg/mL浓度UA干预在高脂24 h以及高糖高脂24、48 h环境下,可显著提高MIN6胰岛β细胞活力,差异有统计学意义(P<0.01)。分子对接预测显示UA与AMPK、AKT、mTOR结合能分别为:6.42、6.30、6.74。结论高糖高脂环境下UA能减轻MIN6胰岛β细胞损伤,改善细胞生长形态和细胞活力,预测其机制可能是与直接靶向结合作用于糖尿病靶点蛋白AMPK、AKT、mTOR有关。