体外膜肺氧合全血离体灌注边缘性供肝功能的实验研究

摘要

目的采用体外膜肺氧合(Extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)全血离体灌注边缘性供肝,评估其改善肝脏功能的可行性。方法取6只比格犬按随机数字表法分为实验组和对照组,各3只。对照组犬肝脏常温下热缺血20 min后,用组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐(HTK)器官保存液灌注并冷保存2 h;实验组犬肝脏常温下热缺血20 min后,采用ECMO转流,常温下全血离体连续灌注2 h,用HTK器官保存液灌注并冷保存2 h。HE染色观察两组肝脏组织病理形态,透射电镜观察两组肝细胞及细胞器病理变化;免疫组化SABC法染色,组织化学评分法(Histochemistry score,H-Score)比较两组肝组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平。结果HE染色结果显示,犬肝热缺血20 min,两组肝组织内均出现大量肝细胞肿胀,肝窦内及汇管区可见大量出血;电镜下显示肝细胞核的核仁消失,线粒体数量减少,粗面内质网上附着的核糖体减少。对照组犬肝组织经HTK冷保存2 h后,肝小叶结构不完整,肝窦广泛扩张,大量肝细胞胞质内可见圆形空泡;电镜下可见肝细胞核异形,核仁消失,线粒体形状不规则,线粒体嵴略模糊部分嵴消失;粗面内质网有脱颗粒及灶性溶解发生。实验组犬肝组织经ECMO全血灌注2 h,HTK冷保存2 h后肝小叶结构大致完整,肝细胞肿胀较多,部分肝细胞有空泡状。电镜下肝细胞核圆而饱满,核仁明显,线粒体数量丰富、分布均匀且形状规则,粗面内质网未见明显脱颗粒。对照组在HTK冷保存2 h后,犬肝组织中TNF-α表达的H-Score评分显著高于正常肝组织和热缺血20 min后,差异有统计学意义(P<0.05);实验组在HTK冷保存2 h后,犬肝组织中TNF-α表达的H-Score评分显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ECMO全血离体灌注技术可有效减轻离体供肝的缺血再灌注损伤,有助于提高边缘性供肝的质量。