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E47和LOXL2表达下调对食管鳞癌Eca-109细胞迁移和凋亡的影响研究

     

摘要

目的 探讨核转录因子E47和赖氨酰氧化酶样蛋白-2(LOXL2)基因表达下调后对食管鳞癌细胞株Eca109迁移、凋亡的影响及其机制.方法 采用RNAi技术沉默E47和LOXL2基因作为实验组,同时设立空白对照组和阴性对照组.采用实时荧光定量PCR及Western blot检测各组细胞中E47、LOXL2基因mRNA和蛋白表达水平,通过流式细胞术和Transwell检测细胞凋亡和迁移变化,采用免疫共沉淀技术检测E47和LOXL2蛋白相互作用.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,E47、LOXL2 mRNA和蛋白表达水平下调;流式细胞术和Transwell实验结果显示,E47和LOXL2干扰后Eca109细胞的凋亡率增高(P<0.01),细胞迁移数目降低(P<0.01).免疫共沉淀结果显示E47和LOXL2蛋白存在相互作用.结论 E47和LOXL2表达下调可以抑制Eca109细胞迁移,并诱导细胞凋亡,E47和LOXL2蛋白相互作用可能促进食管癌细胞的恶性增殖和侵袭.

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