基于网络药理学的昆仑雪菊总黄酮对食管癌细胞的抗瘤作用

摘要

目的 探讨昆仑雪菊总黄酮对食管癌的抗瘤作用及可能的分子机制.方法 用不同浓度的雪菊总黄酮提取物与Eca 109细胞共孵育后,光镜观察Eca 109细胞形态的变化,噻唑蓝(MTT)法检测雪菊总黄酮对Eca 109细胞的生长抑制作用;应用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)及在线枟人类孟德尔遗传枠(OMIM)数据库查找雪菊总黄酮成分 、靶点及食管癌的相关靶点信息,Cytoscape3.2.6软件进行网络构建 、分析及可视化工作,构建雪菊总黄酮-靶点-食管癌网络模型,通过DAVID网站进行关键靶点的日本京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果 光镜及MTT结果显示,雪菊总黄酮明显抑制了Eca 109细胞的生长;通过TCMSP数据库找到总黄酮2个主要活性化合物的78个靶点;通过OMIM数据库找到食管癌相关靶点并进行扩展,取高于2倍平均节点度的靶点共141个;将化合物及食管癌靶点映射交集后找到表皮生长因子(EGFR)、Bcl-2、TP53、GSK3B等13个关键靶点,KEGG通路富集分析显示,雪菊总黄酮对食管癌的抗瘤作用可能与影响细胞分裂增殖 、凋亡 、血管生成等生物学过程有关.进一步通过Western blot进行细胞实验的验证结果表明,雪菊总黄酮明显下调了Bcl-2的表达,诱导了细胞的凋亡.结论 雪菊总黄酮对食管癌的抗瘤作用是多靶点 、多途径的,PI3K/Akt信号通路可能发挥关键作用.