甜菊钙调蛋白基因的克隆及结构分析

摘要

钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应 .我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA ,逆转录合成cDNA第一链 ,以此为模板 ,参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成 5’端和 3’端引物 ,利用多聚酶链式反应 (PCR)扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因 .序列分析表明 ,它们均由 4 5 0个核苷酸组成 ,编码 14 8个氨基酸 .在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白基因均有很高的同源性 ,同源率在 83%以上 ,编码的氨基酸序列同源性更高 ,同源率高达 95 %以上 .这两个基因之间存在差异 ,其核苷酸序列同源率为 85 % ,编码区的氨基酸序列的同源率为 99% ,仅在第 12