重组可溶性人TRAIL抑制肿瘤细胞增殖

摘要

取健康人外周血得到总RNA,利用RT-PCR获取全长TRAILcDNA,以此为模板,在2对不同的引物下作PCR,得到不同长度的DNA片段,克隆到表达载体pET30a,得到重组质粒pET30a-TRAIL(114～281)和pET30a-TRAIL(120～281),转化E.coli BL21(DE3)pLySs表达并纯化了2种不同长度的可溶性蛋白,分别是TRAIL(114～281)(蛋白A), TRAIL(120～281 )(蛋白B).经MTT(四甲基偶氮唑盐)实验表明蛋白B能在6 h内抑制不同类型的肿瘤细胞增殖,但其活性明显弱于蛋白A.