恙虫病东方体目视LAMP现场化检测方法的建立

摘要

目的 建立基于"染料-蜡丸"的目视LAMP检测恙螨中恙虫病东方体的方法,为恙虫病的防治提供新工具.方法 选择Ot GroEL基因作为检测靶序列,在线设计并合成LAMP引物.构建rOt-GroEL重组质粒作为阳性对照.建立基于SYBR Green I的"染料-蜡丸"目视LAMP,并联合便携式LAMP仪使其利于现场应用.结果 新设计的引物针对Ot GroEL基因的237 bp靶区域,所构建的重组质粒rOt-GroEL测序结果正确.在便携式LAMP仪上运用"染料-蜡丸"目视LAMP法,其检测下限为1×102拷贝质粒.结论 成功建立了一种可与便携式LAMP仪联合使用的检测恙螨体内恙虫病东方体的"染料-蜡丸"目视LAMP法.