转FasL基因卵巢癌HO-8910细胞系的建立

摘要

目的建立表达转FasL基因卵巢癌细胞系,为以FasL为靶点治疗卵巢癌提供理想细胞模型。方法应用分子克隆技术,将人FasLcDNA片段正向插入逆转录病毒载体pLXSN构建重组质粒pL(hFasL)SN,转染包装细胞PA317收获假病毒上清,磷酸钙法转染卵巢癌HO-8910细胞筛选建系,酶切PCR鉴定、流式细胞仪(FCM)法检测。结果酶切鉴定证实重组质粒pL(hFasL)SN中存在FasL,PCR方法从转染细胞HO-8910-FasL基因组中扩增出0.86kb片段,FCM检测显示FasL表达增加40.32%,HL60细胞与HO-8910-FasL细胞共培养HL60细胞凋亡增加25.65%。结论应用逆转录病毒法建立了稳定高表达FasL并具功能的HO-8910-FasL细胞系。