兔脂肪来源干细胞表面标记分析及向心肌样细胞分化

摘要

目的分析兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCS)表面标记并且对其进行体外诱导,观察其向心肌细胞分化的潜能,探讨脂肪来源细胞治疗缺血性心脏病的可能性。方法应用酶消化法获得兔ADSCs,并在DMEM培养基中进行体外培养。取第二代细胞以流式细胞术鉴定其表面标记。第二代细胞经5-AZA(浓渡为10μmol／L)处理24 h,第2天更换新鲜培养液,以后每3 d换液1次,诱导3周后,应用RT-PCR检测心肌细胞特异性α肌球蛋白重链(α-MHC)基因及免疫荧光检测心肌肌钙蛋白(cTNT)。结果流式细胞术检测显示Sca1、CD44、CD117高表达,CD34和CD45低表达。诱导后细胞表达cTNT。RT-PCR显示与正常心肌组织α-MHC阳性条带对照,诱导后ADSC也在相同位置出现α-MHC的阳性条带,而未诱导ADSC没有阳性条带出现。结论ADSC具有间质干细胞的特征,ADSC在一定诱导条件下向心肌样细胞分化,是一种有潜力的治疗缺血性心脏病的移植细胞。