外源性FGF-2对高糖环境下内皮祖细胞功能的影响

摘要

目的观察外源碱性成纤维细胞生长因子-2(basic fibroblast growth factor-2,FGF-2)对高糖环境下内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能的影响。方法体外分离和培养小鼠EPCs,并采用流式细胞分析和免疫荧光染色进行细胞鉴定,分别在高糖(30 mmol/L)和高糖(30 mol/L)+FGF-2(30、50、100、150、300 ng/m L)条件下干预培养,正常EPCs作为空白对照组,TUNEL检测细胞凋亡,Transwell小室和基质胶在体外观察EPCs的迁移和成管能力;Western印迹法检测活化β-catenin和总β-catenin的表达,构建小鼠后肢缺血模型,分别注射空白组、正常组、高糖组及高糖+FGF2(150 ng/m L)组EPCs,使用激光多普勒血流仪观察小鼠缺血后肢血流恢复情况。结果高糖组EPCs比空白对照组凋亡率显著增高(P<0.01),迁移和血管形成能力显著降低(P<0.01);高糖+FGF-2组EPCs与高糖组相比,细胞凋亡显著减少(P<0.05),迁移和血管形成能力显著增强(P<0.05),且在150 ng/m L FGF-2时效果最强(P<0.01)。Western印迹法分析表明,高糖组较空白对照组活化β-catenin/总β-catenin显著下降(P<0.01),而高糖+FGF-2组与高糖组相比则显著升高(P<0.05)。体内实验显示,高糖组小鼠缺血后肢较正常组血流恢复显著减少,而高糖+FGF-2组较高糖组显著增加。结论外源性FGF-2处理可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥对高糖下受损EPCs的功能修复作用。