理性设计降低碱性蛋白酶的胶原降解活力

摘要

以克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶(PRO)为研究对象,运用HotSpot Wizard 3.0设计了PRO在Gly97-Gly102 loop区的突变库,筛选得到了胶原蛋白降解活力显著降低的G97E突变体.G97E突变体的碱性蛋白酶活力和胶原蛋白降解活力分别为野生型PRO的91.97％和65.84％;最适温度和最适pH分别为60°C和pH 10.0;其稳定性相比于野生型PRO无显著差异.综上所述,本研究利用理性设计技术,获得了在碱性蛋白酶活力基本保持不变的情况下,胶原蛋白降解活力显著降低的G97E突变体,这个新酶品种的开发和工业化生产对于扩大PRO在皮革工业中的应用具有重要意义.