白喉毒素突变体CRM197原核表达载体构建及其蛋白表达

摘要

将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pBAD-DEST49中,转化到大肠杆菌菌株(ATCCMC1061).经阿拉伯糖诱导,CRM197获得高效表达.目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换后获得高于95％纯度的CRM197样品.用该样品做Western blotting鉴定后,能得到单一的特异性条带.本实验的表达策略,为CRM197进一步生产及应用奠定基础.