副溶血弧菌与Hela细胞表面蛋白结合相关外膜蛋白的筛选和鉴定

摘要

为了从副溶血弧菌(VP)中筛选出可与宿主细胞表面蛋白互作的外膜蛋白,并研究其与宿主细胞的黏附作用,以Hela细胞株为宿主,将其表面蛋白生物素化后作为靶蛋白,利用层析技术从VP中垂钓到可与之结合的外膜蛋白,对重组蛋白进行质谱鉴定、纯化和Western Blot检测,并采用间接免疫荧光法考察重组蛋白对Hela细胞的黏附能力.从VP中共筛选出5种可与Hela表面蛋白相结合的外膜蛋白,质谱鉴定结果表明:5种蛋白分别为Peptidase、PLP、OmpW、OmpN和Chaperonin,均为胞外蛋白.OmpW、Chaperonin和Peptidase对Hela细胞的黏附作用很强,OmpN的黏附能力次之,PLP的黏附能力最弱.